论著
邓钊红1, 王亚芳2, 3, 何佳怡2, 3, 田代实2, 3, 王伟2, 3, 胥瑾1, 秦川2, 3
目的:探讨福他替尼(Fostamatinib)对血管性痴呆(Vascular Dementia,VaD)中小胶质细胞NLRP3的
作用机制。方法:①构建双侧颈总动脉狭窄(bilateral common carotid artery stenosis,BCAS)小鼠模型,通过
八臂迷宫行为学验证小鼠认知功能受损情况,设置假手术组(Sham)及BCAS术后3 d、1个月、3个月多个时
间点,采用免疫荧光染色,劳克坚牢蓝染色(LFB)等方法评估小胶质细胞活化与白质损伤程度,选取损伤最
显著的时间点作为造模组;②设置对照组、BCAS造模组及(BCAS+福他替尼治疗)组,采用免疫荧光染色和
LFB染色方法探究福他替尼对BCAS小鼠的小胶质细胞激活,白质损伤,认知功能障碍及相关炎症因子表
达的影响;③体外建立原代小胶质细胞外源性髓鞘刺激模型,给予福他替尼或 siRNA 处理,通过 Western
blot和实时荧光定量PCR技术,检测炎症通路关键蛋白及基因的表达变化。结果:①与对照组相比,造模组
BCAS术后1个月时小鼠记忆功能受损,LFB染色白质损伤评分最高,同时髓鞘碱性蛋白(MBP)荧光强度减
弱最为显著,Sholl分析结果发现小胶质细胞活化程度也最为明显;②与造模组相比,福他替尼治疗组小鼠
参考记忆有所改善,白质损伤评分降低,Sholl分析结果显示小胶质细胞活化减少,免疫荧光染色促炎因子
NLRP3和SYK的表达均显著下降(P<0.05);③体外福他替尼处理可显著降低髓鞘处理后的小胶质细胞中
NLRP3、SYK、ASC、Caspase-1及IL-18等炎症相关因子的表达(P<0.05);使用siRNA敲低SYK后,炎症因
子表达下调结果与前一致(P<0.05)。结论:福他替尼可能通过抑制SYK改善小胶质细胞NLRP3炎症小体
炎症通路的活化,减轻神经炎症反应,缓解髓鞘损伤,促进脑白质缺血后结构重建和认知功能的恢复。